禽流感的诊断与防治

    付文艳

    摘要:禽流感是一种严重危害鸡群的高度接触性传染病,其中高致病性禽流感(HPAI)能引起鸡发生全身败血症,并伴有突然死亡和高死亡率,严重危害养禽业,受到养禽业者的高度关注,介绍总结了禽流感的不同诊断和防制方法,用以指导广大养殖户。

    关键词:禽流感;高致病性;诊断;防制

    中图分类号:S858.31 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2014)10-0030-02

    1 病原

    禽流感的病原为禽流感病毒,属于正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒[1]。病毒表面有囊膜,其上镶嵌着两种重要的纤突,分别为血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。目前已发现有16种特异的HA和10种特异的NA,分别命名为H1~H16,N1~N10。根据A型流感各亚型毒株对禽类的致病力不同,禽流感病毒被分为高致病性病毒株、低致病性毒株和不致病性毒株。历史上的高致病性禽流感病毒都是由H5和H7引起的。

    2 流行病学

    禽流感病毒能自然感染许多种类的家禽和野禽,家禽中以火鸡、鸡最易感。自然界的鸟类都可带毒,水禽带毒最为普遍。不同种属的动物间也可以传播。

    感染禽经呼吸道和消化道排出病毒,即通过直接接触或病毒污染物的间接接触传播。通过呼吸道、消化道、眼结膜及损伤皮肤等途径都有可能受到感染,但通常以消化道为主。该病一年四季都会发生,但以冬季和早春气温骤冷骤热的季节最常发生[2]。

    3 临床症状

    低致病性禽流感,最常见的症状是产蛋率下降,有时可从90%的产蛋率短时间内下降到10%以下。少数产蛋率下降的病鸡眼角分泌物增多,个别出现面部肿胀。严重时呼吸困难,下痢,采食量下降,死亡率升高,若加强饲养管理并适当使用抗菌药,则不会造成重大经济损失[3]。鸡被一些不致病的毒株感染后,无明显临床症状和病理变化,但可能不断排毒。

    4 病理变化

    4.1 眼观病变

    低致病力引起的病例一版没有典型的病变,表现为轻微的窦炎;喉气管充血、出血,气管下段和支气管内有黄白色纤维素栓子堵塞;气囊炎,有纤维素性或干酪样渗出物附着物;有时可见纤维素性心包炎;产蛋鸡常见卵巢退化、出血和卵泡畸形;输卵管黏膜充血水肿,内有白色纤维素渗出物。

    高致病性病毒株引起的病变主要是肌肉、组织器官黏膜、浆膜以及脂肪的广泛出血。冠状脂肪、心外膜有出血点,心肌坏死;腹部脂肪有出血点;胰腺有黄白色坏死斑或出血;腺胃乳头出血,十二指肠黏膜出血;喉气管黏膜充血、出血[4]。

    4.2 组织学病变

    组织学病变不尽相同,较常见的为心肌炎,心肌纤维坏死,胰腺炎,腺泡细胞坏死,肝、脾、肾、心肌充血、水肿、出血,脑血管周围形成淋巴细胞血管套,脑组织坏死,神经胶质细胞增生等。

    5 诊断

    5.1 临床诊断

    根据发病特点、典型症状和剖检特征可作出初步诊断,但实验室诊断确定亚型在临床上有着现实的意义。

    5.2 实验室诊断

    5.1.1 病毒的分离 可选取病死禽的气管和支气管、心、肝、脾,以及直肠、泄殖腔或喉气管棉拭子等作为分离病毒的病料。

    病料和生理盐水1:5(g:mL)比例匀浆后离心取上清,经过药物灭菌或过滤除菌,经尿囊腔接种SPF鸡胚,0.1~0.2 mL/个,置37 ℃温箱中培养。取18 h后死亡的鸡胚的尿囊液待检。对第5天尚未死亡的鸡胚,处理后收取尿囊液。样品一部分作HA检测,另一部分作下一代鸡胚盲传,如连续盲传2~3代HA仍呈阴性即可放弃。

    5.1.2 病毒的鉴定 确定是否为A型流感病毒后需要做亚型的鉴定。常用方法是琼脂扩散试验、血凝和血凝抑制试验。①琼脂扩散试验:由于A型禽流感病毒有一样的核衣壳和基质抗原,可用被感染鸡胚的尿囊液或尿囊膜研磨匀浆,反复冻融后取上清液作抗原,与已知A型禽流感抗血清作琼脂扩散试验,如为阳性,则证实被分离病毒为A型流感病毒。②血凝和血凝抑制试验:取收获的鸡胚尿囊液,检测对鸡红细胞的凝集效价(HA),如HA呈阳性反应,则分别用已知的禽流感阳性血清H1~H15亚型以及N1~N9亚型神经氨酸酶抗血清与已知病毒做微量抑制试验,已确定被分离病毒的HA与HA的亚型。

    5.1.3 流感病毒致病性的鉴定 将感染病毒的鸡胚尿囊液作10-1稀释后,经静脉接种8只48日龄的敏感鸡,0.2 mL/只。在接种后10 d内,死亡数量在6只或6只以上时,该病毒为高致病力禽流感病毒。

    被分离的病毒能致死1~5只鸡,但不是H5或H7亚型的病毒,则将病毒接种于细胞上,如病毒在缺乏胰蛋白酶时不能在细胞上生长,不能形成细胞病变,则为非高致病力禽流感病毒。

    被分离的病毒能致死1~5只鸡,且是H5或H7亚型,则如果血凝素多肽经氨基酸序列分析,与高致病力禽流感的序列相似,则被认为高致病力禽流感病毒。

    其他检验方法,如RT-PCR、荧光抗体技术、中和试验、ELISA试验、补体结合反应等均可用于禽流感的诊断。

    5.3 鉴别诊断

    禽流感的流行特点、症状及病变与新城疫相似,两者极易混淆,必须作鉴别诊断。

    高致病性禽流感和典型新城疫共同之处在于高死亡率和剖检腺胃乳头出血,但新城疫神经症状较禽流感明显,肠道有枣核样病变。而禽流感冠黑紫,头面部水肿,头部皮下水肿胶样浸润,心外膜出血严重,但肠黏膜无坏死溃疡。低致病性禽流感引起的产蛋下降极易与非典型新城疫混淆,可通过禽流感或新城疫抗体测定以抗体是否异常来确定。

    6 防制措施

    6.1 防疫措施

    (1)注意做好常规的卫生防疫工作。病毒可能通过流动的空气、飞鸟的粪便等进入禽场内。经常消毒可将环境内存在的病毒消灭或降低其数量,避免或减少疾病的发生[5,6]。

    (2)免疫接种可以避免养禽业的严重损失。目前,禽流感疫苗主要使用灭活疫苗和基因工程疫苗。禽流感病毒具有高度变异性,一般都限制弱毒疫苗的使用,以免发生变异,形成新的高致病力毒株。现阶段禽流感H5和H9油乳剂灭活疫苗在市场广泛使用。

    6.2 发病时的紧急处理措施

    (1)一旦发现高致病力禽流感可疑病例,应立即向当地兽医部门报告,同时对病鸡场进行封锁隔离;一旦确诊,立即在有关兽医部门指导下,划定疫点、疫区和受威胁区。县及县级以上兽医行政主管部门报请同级地方政府,由地方政府发布封锁令,实施严格的防范措施。禁止疫区内的家禽及其产品的贸易流动,设立临时消毒关卡对进出运输工具等进行严格消毒,对疫区内易感鸡群进行监控,同时加强对受威胁区内禽类的监察。在对疫点内的禽类及相关产品进行无害化处理后,要对疫点进行彻底消毒,彻底消毒21 d后,如受威胁区内的禽类未发现有新的病例出现,即可解除封锁。

    (2)对非高致病力禽流感,加强饲养管理,适时使用抗病毒药物,仍具有早期预防、减轻症状和减少损失的作用。

    总之,通过对禽流感病原学、流行病学等方面更深入了解 ,我们才能进行更好的诊断和防治,从而更好地避免高致病禽流感给我国养禽业造成大的危害。

    参考文献:

    [1] 于 洋,李敬双.禽流感病毒研究进展[J].畜牧兽医科技信息,2010(11):11-13.

    [2] 石立斌,陈海花.禽流感的防治措施[J].中国畜牧兽医文摘,2014,30(6):135.

    [3] 陈辅云.禽流感研究进展[J].养殖与饲料,2013(9):47-48.

    [4] 闫 强,陈明勇.禽流感的特点分析及防控研究进展[J].中国农业大学学报,2005,10(6):4-6.

    [5] 吴胜香,陈芳,吴胜峰.规模禽场禽流感的综合防控措施[J].国外畜牧学(猪与禽),2010,30(5):77.

    [6] 王金培,郑兴中.鸡新城疫与禽流感鉴别[J].中国畜禽种业,2011(11):144.