蓝狐的人工授精技术
刘敏 刘涛 蒋岩
摘要：人工授精可以提高种公狐的利用率，加速良种狐的改良工作，有效防止狐生殖道疾病的传播。简要阐述了狐的人工授精技术，为实际生产提供参考。
关键词：蓝狐；发情鉴定；人工授精
中图分类号：S865.2+3 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2014）08-0064-03
随着经济的发展和人民生活水平的提高，养狐业的发展前景越来越广阔。与国外相比，我国养狐业具有明显的优势，一是我国生产狐产品的成本较低，主要是劳动力成本低，容易获得较高的利润，如在我县目前每只狐的利润在300元左右。二是我国具有巨大的消费市场。经济的发展使我国服装行业的消费群体从过去的耐用、实用型向高档次看齐，动物裘皮特有的光彩为其他产品无法替代。目前我国裘皮的人均占有量还相对较低，国产高档毛皮数量远远不能满足消费者需求，很大程度上仍依赖进口。因此，充分利用我国的资源优势，开展蓝狐的规模化养殖前景十分广阔。
1 开展狐人工授精技术的好处
开展狐人工授精有以下好处：①可提高良种狐利用率（公狐自然交配一般3～4只母狐，人工授精时，一只公狐可授精20～30只母狐）；②克服自交中的一些困难如公母大小不好配、母狐拒配、母狐弓腰难配及母狐外生殖器畸形等；③可减少部分疾病的发生和传播；④可提高母狐的受胎率、产仔数；⑤节省了人工、饲养及栏舍等开支[1]。
2 种公狐的选择、管理与防疫
2.1 种公狐的选择
选择纯种和品质优良、繁殖力强的个体作种狐。用于杂交改良的北极狐公狐必需是纯种的。种公狐不要过肥达中等略偏上体况为佳。
2.2 种公狐的管理
在不同季节和不同发育期，对种公狐要采取各个时期适宜的管理方法。冬季要防寒保暖，增加运动和光照，夏季要做好防暑，特别在繁殖期要合理搭配各种所需营养，过肥过瘦都不好。
配种期来临前1个月，采取公、母狐互换笼舍，通过异性刺激促进狐群的性兴奋。
2.3 种公狐的防疫
预防种狐生殖道疾病：12月份至翌年1月份及时注射狐阴道加德纳氏菌病和绿脓杆菌疫苗，做好生殖道疾病防疫[2]。
3 狐的人工授精技术
3.1 场地和种狐的消毒
人工授精的场地清扫干净后地面用2%福尔马林或5%工业用苛性钠溶液或10%～20%的漂白粉溶液消毒，也可用喷灯火焰消毒。
人工授精中的保定人员和操作者要固定在本区内工作，不要随意乱串，要穿消过毒的工作服、工作鞋。操作人员的手须用75%乙醇擦后再用中性水或蒸馏水冲洗。采精或输精所用器械，每次使用前都必须清洗，然后用l%新洁尔灭溶液消毒，最后还要用中性水或蒸馏水冲洗。
采精或输精的种狐，对其局部要进行清洗和消毒。如公狐的龟头、包皮及其周围的被毛，在采精前用0.1%～0.2%新洁尔灭溶液浸泡的毛巾拭擦腹部和会阴部，也可用布兜住腹部与肛门区。母狐的外阴及其周围的被毛也要进行清洗消毒。
3.2 授精器械的消毒
许多病原菌通过消毒不彻底的器械在人工授精过程中使母狐生殖器官感染，影响母狐的生殖能力，造成不孕、流产、流脓、胎儿死亡，严重者可造成母狐死亡，如发现母狐阴道有炎症，主要是绿脓杆菌、加德纳氏菌等，用注射用水清洗阴道后，再注入阴道160万U的青霉素。
人工授精器械，如输精器、阴道扩张器、集精杯等，必须经过严格的消毒后方可使用，使用1次消毒1次。消毒方法是用清水冲洗3遍放入烤箱内用250 ℃烘干30 min后即可使用，纱布用蒸锅蒸25 min，蒸好后，用纱布擦公狐阴茎。母狐输精要1只母狐用1根输精器，1个阴道套管，器械不能交叉使用。
3.3 采精
3.3.1 捉狐 用捉狐器套住狐头，固定住，然后抓后臀部皮肤，捉住后拉出，这样使狐不受伤。
3.3.2 操作过程 采精时先按摩公狐睾丸和会阴部，给狐一个采精信号。按摩数秒后，采精者将拇指、食指捏在公狐阴茎两侧，中指捏在阴茎腹面，捏住阴茎中部并沿阴茎纵向撸压和滑动阴茎包皮，对阴茎进行摩擦刺激。撸压开始时滑动速度要快一些，大约4～5次/s，撸动幅度约7～8 cm。撸压5～7 s后，阴茎勃起，随之阴茎中部的球状海绵体膨大。此时，将阴茎从公狐两后腿之间拉向后方，将包皮撸至球状海绵体后方继续撸压球状海绵体和后部的阴茎，撸压速度减慢，每10 s撸压12～13次。撸压球状海绵体时，稍用力些，如此反复撸压按摩（5～7 s或约10 s）直至公狐射精为止。为提高采精效果，按摩时应配合公狐性反射行为调整撸压按摩频率和力度，以刺激公狐排精。适度的撸压刺激公狐表现兴奋和舒适，刺激力度不够，公狐无性反射，阴茎勃起速度慢且不坚挺，而刺激力度过强时，公狐有痛感，性反射抑制。
3.3.3 精液的接取收集 在一只手按摩公狐阴茎即将开始射精时，另一只手握住集精杯底部准备接取精液。公狐射精时，首先射出的是副性腺分泌物，白色透明尿样，可不接或接取弃之不用。后射出的是乳白色的精液，要及时接取在集精杯内。公狐射精过程中仍需对其按摩刺激，整个撸压采精过程大约需几十秒钟，最多不超过2min。公狐射精结束后待阴茎回缩时将包皮向阴茎头部撸挤，使阴茎复原，将精液迅速送往精检室内，放在37℃保温瓶或水浴锅内，并做好采精记录。初次采精时，不能过于急躁，必须经过2-3d训练后才能形成条件反射。
3.3.4 采精频度 公狐每周采精2～3次，如果连续采精2～3 d应休息1～2 d。
3.4 精液的品质检查
3.4.1 精液量检测 集精杯上有刻度，可直接读取记录。一般狐每次采精量为0.25～2.00mL（不含精清）。
3.4.2 色泽及气味 正常的精液颜色为白色、均匀、不透明。气味微腥或无味，颜色和气味异常的精液不能供输精使用。
3.4.3 精液的pH检测 用pH试纸蘸少量精液比色检查。狐精液pH为6.5，偏酸，如pH改变，说明精液中混有异物，如尿液、不良稀释液或狐副性腺有病等，不能用作输精。
3.4.4 精子活力检查 简易方法是滴l滴待检的精液于载玻片上，制成精液压片在35～37 ℃条件下用显微镜观察精子运动情况，精子活力以直线前进运动精子的百分比表示，活力低于70%不能用其输精。
3.4.5 精子密度 狐的精子一般每毫升精液含精子7亿-8亿个，个别优良个体可达每毫升精液含精子13亿个。精子密度低于0.5亿个/mL时不能提供输精用。
3.4.6 畸形精子 畸形精子多、精液品质低，受胎率就低。畸形精子有巨形、短小、双头、双尾、头尾残缺、无尾、互相粘连及带有原生质颗粒等。畸形率超过20%的精液不能供输精用。
3.5 精液的稀释与保存
3.5.1 稀释 经检验合格的精液，要根据原精液的精子密度用特制的稀释液进行稀释。精液稀释的适宜倍数：按精液密度、活力和畸形精子率的检测结果计算出每毫升原精子中有效精子数，再按稀释后精液应含有的有效精子数（7 000万个/mL）和当日输精母狐数量计算出稀释倍数。稀释倍数=每毫升原精液中有效精子数/输精时每毫升稀释精液中所要求的精子数。
精液稀释的操作：事先把精液稀释液移至试管内，并置于盛有35～37 ℃的广口保温瓶或水浴锅内保存备用。稀释时先按适宜稀释倍数准确量取所需的稀释液，再将稀释液沿集精杯壁缓慢加入到精液中，轻轻摇匀，严禁稀释液快速冲入精液和剧烈震荡。
3.5.2 保存 稀释后的狐精液适于25～35 ℃条件下保存，保存时间不超过3 h。低温保存、冷冻保存技术尚不成熟。
3.6 母狐发情鉴定
3.6.1 根据症状鉴定 母狐发情时，躁动不安，运动量增加；食欲减退，排尿频繁，尿液较浓，呈黄绿色；经常用舌舔舐外阴。发情盛期，食欲废绝，不断发出急促的“嗷嗷”求偶叫声。发情后期，活动逐渐趋于正常，饮食恢复，精神安定。
3.6.2 外阴检查 根据母狐外阴生理和形态变化，可将母狐的发情期（10～12d）分为5个阶段。第一至第三阶段为发情前期，第四阶段为发情排卵期，第五阶段为发情后期。
第一阶段：阴毛分开，阴门明显可见，阴门由静止期的阴毛覆盖变为外凸肿胀，阴蒂增大。仪器检验，阴道涂片可见白血球多，在个别标本中可看到有核细胞。这时母狐卵巢中滤泡正在逐渐扩大，卵巢体积约达1 cm3。此阶段正常情况可持续2～3 d，个别的延续5～7 d。
第二阶段：阴门肿胀，用手触摸有弹性，阴蒂增大。仪器检验，阴道涂片可见到有核细胞增多。这时母狐卵巢体积增加到1.5～2.0 cm3，滤泡显著增大。此阶段大约经过l～2d。
第三阶段：阴门极度肿胀，肿胀面光亮、较硬、凸起，阴蒂呈红色的圆锥形。仪器检查，阴道涂片可观察到有大约同等数量的有核细胞和角质化无核细胞。这时，母狐的卵巢体积增至2.0～2.3 cm3，滤泡达到豌豆粒大小。此阶段一般持续2～3 d。
第四阶段：阴门近于“O”形、外翻、湿润，可见分泌出的乳白色或微黄色黏液。阴门颜色渐深，呈暗红色，肿胀面变软，上面有轻微的皱褶，阴蒂稍萎缩，这时成熟的卵细胞逐渐排出。仪器检验，阴道涂片可见到角质化的无核细胞占多数，这正是交配的最佳时机。此阶段，北极狐可持续3～5 d。
第五阶段：阴门肿胀开始消退，逐渐恢复正常，周围颜色变深。卵巢开始缩小，排卵结束，黄体形成。仪器检验，阴道涂片上可见到有核角质化上皮细胞和白细胞。幼年母狐的外生殖器官和成年母狐相似，但不如成年母狐明显，发情期较成年母狐延续的时间长一些，可达8～10d。
3.6.3 放对试情 公狐试情法是将母狐放到公狐笼舍内，根据母狐的行为来判断母狐的发情程度。当发现母狐嗅闻公狐的阴部，抬尾接受公狐爬跨和不回头咬公狐时，可认为母狐进入发情持续期，即配种适宜期。这时可将母狐与试情公狐分开，放到预配的公狐笼内或人工授精站进行实配。如发现母狐仍未达到适宜期而拒配时，应立即将母狐分出，避免母狐惊恐。可次日或隔日再放对，或放入其他种公狐笼试配。
有些公狐或初次发情的母狐，外阴部发情无变化，但已达到发情持续期，在行为上完全接受公狐交配，这叫隐性发情，放对有促进母狐发情的作用。试情时间不要过长，一般不要超过20 min，如不接受交配，次日再进行试情。
3.6.4 发情检测器检测 母狐发情时用发情检测器测定发情母狐阴道电阻值，电阻值逐渐增高至峰值为发情前期，达峰值后电阻值明显下降时为发情期。最佳输精时间的选择为北极狐在电阻峰值下降第2天。
3.6.5 阴道细胞学检查 用棉签或吸管蘸取或吸取阴道分泌物制成涂片，在200～400倍显微镜下观察，圆型细胞逐渐减少，角化细胞逐渐增多为发情前期；角化细胞占满视野，圆型细胞缺少为发情期即适宜输精期；角化细胞减少，圆型细胞又重新出现时为发情后期。
3.7 输精
3.7.1 输精器材的准备 输精前应做好输精器、阴道插管、注射器、酒精棉球等准备工作。室内温度应保持在18～25 ℃，同时按常规进行室内外的消毒工作。所用授精器材如输精品、阴道插管等经事先严密消毒备用，使用时每狐l份。用后再统一消毒处理。所用5 mL注射器最好为医用一次性注射器。
3.7.2 输精操作 输精时两人配合操作，一人保定，一人输精。保定人员用保定钳保定母狐，一手握住母狐尾部使尾朝上，用0.1%～0.2%新洁尔灭消毒液消毒外阴部及其周围部分。
先将阴道插管插入母狐阴道内，其前端抵达子宫颈；左手虎口部托于母狐下腹部，以拇指、中指和食指摸到阴道插管的前端。以左手拇指、食指、中指固定子宫颈位置（向斜下方压开膣器，先摸开膣器的头部然后在过管头l cm范围内摸到花生粒至黄豆粒大小的凸起，随着开膣器的运动而运动，即可判定为子宫颈），右手握持输精器末端把阴道插管内腔插入，前端抵子宫颈处调整输精的位置探寻子宫颈口。左手、右手配合将输精器前端轻轻插入子宫体内1～2 cm，固定不动。由助手将吸有精液的注射器插接在输精器上，推动注射器把精液缓慢地注入子宫内，输精技术熟练者，也可事先将吸有精液的注射器插在输精器上，由输精者直接将精液输入。向注射器内吸取精液时，应注意注射器的温度与精液温度一致，缓慢吸取至固定的刻度，可再吸入少许空气，以保证输精时将所有精液输入子宫内，以防残留在输精针管腔内，造成浪费。输精后轻轻拉出输精器，如果输精手法得当，母狐生殖道无畸形，则输精过程中母狐表现安静。每次输精量为稀释后的1～1.5mL，输入有效精子不少于7 000万。输精次数，一般连续输精2～3次，每日1次。初次输精误为假发情时，待发情后再输2～3次。
3.7.3 输精效果判断 拉出输精器时手感觉有点阻力，拉出输精器时无血液，拉出输精器时精液不倒流，镜检输精器内残留的精液，精子活力不低于70%。
3.7.4 人工输精结束后工作 清洁消毒：一个批次的人工授精器材（如上、下午、一日），输精结束后立即清理室内卫生、清洗消毒人工授精器材，室内地面用新洁尔灭消毒液消毒；整理：每日人工授精工作结束后整理好输精记录，做好下批次人工授精准备工作；归档：每年人工授精工作结束后，所有有关记录、技术资料要进行归档和存档，以备查阅。
