丹皮-蒲公英及其配伍对慢性应激小鼠胃肠动力的影响
李晓潇 黎璇 黄继杰 莫庸 李清霞 李梦 黎旭 李月清 黄丽娟 阳秀英
【摘要】 目的 探究丹皮-蒲公英及其配伍對慢性应激小鼠胃肠动力的影响。
方法 将70只小鼠随机分为正常对照组、模型组和丹皮、蒲公英及其不同配伍组共7个组。除正常对照组外，其余组采用不可预知的多种应激方式造模28 d复制小鼠胃肠动力障碍性模型。造模第15天起，模型组和正常对照组给予生理盐水，其他各组分别相应给予丹皮、蒲公英及其两者不同配伍的提取液进行小鼠灌胃处理，1次/d，给药2周后测定小鼠胃残留率和小肠推进率。
结果 与正常对照组相比，模型组小肠推进率明显降低（P<0.05），蒲公英组、丹皮∶蒲公英=1∶2组的小肠推进率明显增高（P0.05）;与模型组比较，各组小肠推进率均明显升高（P<0.05或0.01）;丹皮配伍蒲公英组小肠推进率均明显高于丹皮组（P<0.05或0.01）;丹皮∶蒲公英=1∶1组、丹皮∶蒲公英=2∶1组小肠推进率明显低于蒲公英组（P0.05）。
结论 蒲公英、丹皮对应激性胃肠动力障碍均具有促进作用，丹皮和蒲公英合适配伍能更好地改善胃肠动力障碍。
【关键词】 丹皮;蒲公英;慢性应激;胃肠动力
中图分类号：R285.5?? 文献标志码：A?? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.04.002
Effect of cortex moutan and dandelion and their compatibility on gastrointestinal motility in chronic stress mice
[HJ1*2][HJ]
LI Xiaoxiao1， LI Xuan1， HUANG Jijie1， MO Yong1， LI Qingxia1， LI Meng1， LI Xu1， LI Yueqing1， HUANG Lijuan2， YANG Xiuying2
（1. School of Clinical Medicine， 2.Department of Physiology， Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000， Guangxi， China）
[HJ2][HJ]
【Abstract】 Objective To investigate the effects of cortex moutan and dandelion and their compatibility on gastrointestinal motility in chronic stress mice.
Methods 70 mice were randomly divided into 7 groups： normal control group， model group， cortex moutan group， dandelion group， and their different compatibility groups. In addition to the normal control group， models in the other groups were cultured for 28 days by various unpredictable multiple stress methods to replicate the model of gastrointestinal dyskinesia in mice. From the 15th day of the model culturing， the model group and the normal control group were given normal saline， and the other groups were correspondingly given the extracts of cortex moutan， dandelion and different compatibility of them once a day for gavage treatment of mice. In addition， gastric residual rate and small intestinal propulsion rate were measured after two weeks of administration.
Results Compared with the normal group， the small intestinal propulsion rate of the model group significantly decreased （P < 0.05）， the small intestinal propulsion rates of the dandelion group and 1 ∶ 2 group （the ratio of cortex moutan to dandelion） significantly increased （P 0.05）. Compared with the model group， the small intestinal propulsion rate significantly increased in each group （P < 0.05 or 0.01）. The small intestinal propulsion rates of the cortex moutan to dandelion compatibility groups significantly higher than that of the cortex moutan group （P < 0.05 or 0.01）. The small intestinal propulsion rates of the 1 ∶ 1 group and 2 ∶ 1 group were significantly lower than that of the dandelion group （P 0.05）.
Conclusion Dandelion and cortex moutan can promote the stress gastrointestinal motility disorder， and the proper compatibility of cortex moutan and dandelion can improve the gastrointestinal motility disorder.
【Key words】 cortex moutan; dandelion; chronic stress; gastrointestinal motility
随着科技的进步和社会的发展，人们的生活、学习和工作压力随之增大，加上不正常的作息和不规律的饮食常常导致胃肠功能紊乱，出现腹痛、腹胀、腹泻以及消化不良等症状。传统中医药在调治胃肠疾病方面有着悠久的历史和良好的疗效。蒲公英味苦、甘，性寒，归肝、胃二经，具有清热解毒、消肿和胃、疏通气机之功效;现代研究表明，蒲公英具有抑菌抗炎、抗肿瘤、促进胃肠运动等作用[1～3]。丹皮为毛茛科植物牡丹干燥根皮，具有清热凉血、活血化瘀的功效，是一味常用的配伍药。药理学研究表明，丹皮具有抗炎、抑菌、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫功能、保护心血管等多种作用[4～6]。《本草纲目》记载，丹皮配伍大黄等药具有消除肠道运动障碍等功效。有民间将蒲公英和丹皮合用治疗消化不良、腹胀、腹痛等胃肠功能紊乱性疾病。因此，本研究通过建立应激性胃肠功能障碍性模型，旨在探讨丹皮、蒲公英及其不同比例的配伍对胃肠动力的调节作用。
1 材料与方法
1.1 动物
6周龄清洁级昆明种小鼠70只，雌雄不拘，体重（25±2）g，由右江民族医学院实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK桂2017-0003。
1.2 药品
蒲公英（黄冈金贵中药产业发展有限公司，批号：D7070101）、丹皮（安徽广和中药股份有限公司，批号：170704）、活性碳末（天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20160916）。
1.3 仪器
生物机能实验系统（BL-420F，成都泰盟软件有限公司）、电子天平（型号：ARII40/C，上海奥毫斯公司生产）。
1.4 蒲公英和丹皮提取液的制备[7～8]
取200 g蒲公英，加蒸馏水2000 mL浸泡1 h，文火煮沸1 h后过滤。药渣再加蒸馏水2000 mL二次煎煮，煮沸1 h后过滤，两次滤液合并，于沸腾水浴浓缩至200 mL，使每mL含有1 g原药材的药液，即1 g/mL。牡丹皮煮法同蒲公英。分装保存于冰箱备用。两者混合液分别按不同的比例混合。
1.5 造模与分组
取70只小鼠按体重随机分为正常对照组（生理盐水）、丹皮组、蒲公英组、丹皮∶蒲公英=1∶1组、丹皮∶蒲公英=1∶2组、丹皮∶蒲公英=2∶1组和模型组。除正常对照组外，其他各组参考文献资料并加以改进，应用多种不可预知的应激刺激造模[9～10]。应激方式包括禁食24 h，禁水12 h，強迫游泳10 min，夹尾15 min，电刺激足底（电压30 V，每次10 s，间隔15 s，重复3次），倒置悬挂15 min、垫料潮湿饲养24 h等制备应激动物模型。每天随机选取上述刺激中的任意一种，相邻两天的刺激不重复，连续刺激28 d，各种刺激方法平均使用4次。于刺激第15天起，各组按以下相应的药液灌胃给药：正常对照组和模型组给予生理盐水（0.1 mL/10 g），蒲公英组给予蒲公英提取液（10 g/kg）、丹皮组给予丹皮提取液（10 g/kg）、各组蒲公英-丹皮配伍给予相应的配伍提取液（10 g/kg），1次/d，共14 d。造模期间，观察小鼠的一般情况，包括毛发、体重、食欲、活动等变化并与对照组比较。末次给药后，通过胃残留率和小肠推进率检测来综合评价造模结果。
1.6 碳末悬液的制备
将5 g活性碳末放入100 mL蒸馏水中，搅拌均匀，使之溶解，静置12 h，制成5%碳末混悬液。
1.7 指标检测
最后一次灌胃给药前，小鼠禁食12 h，末次给药30 min 后，按20 mL/kg灌服5%碳末悬液。20 min后处死小鼠，剖开腹腔，结扎胃幽门和贲门，取出胃并称胃全重和胃净重。根据下列公式计算胃残留率：胃内容物残留率（%）=（胃全重量-胃净重量）/碳末悬液重量×100%。同时取幽门至回盲部小肠，并测量小肠总长度和碳末推进距离，计算碳末推进百分比。碳末推进率（%）= 碳末在小肠内推进距离/小肠总长度×100%。最终以胃内容物残留率、碳末推进率分别作为胃排空速度、小肠推进速度的评价指标。
1.8 统计学方法
数据处理采用SPSS 20.0软件统计分析，各组数据以（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析（LSD法），检验水准：α=0.05，双侧检验。
2 结? 果
2.1 各组小肠推进率的比较
与正常对照组比较，模型组小肠推进率明显降低（P<0.01），蒲公英组和丹皮∶蒲公英=1∶2组小肠推进率明显增高（P<0.01），丹皮组、丹皮∶蒲公英=1∶1组、丹皮∶蒲公英=2∶1组小肠推进率差异无统计学意义;与模型组比较，各组小肠推进率均明显增高（P<0.05或0.01）。丹皮配伍蒲公英组小肠推进率均明显高于丹皮组（P<0.05或0.01）;丹皮∶蒲公英=1∶1组、丹皮∶蒲公英=2∶1组小肠推进率明显低于蒲公英组（P<0.05）;丹皮∶蒲公英=1∶2组小肠推进率与蒲公英组相当。结果见图1。
2.2 各组胃残留率的比较
与模型组比较，各组胃残留率有所降低，但各组间无统计学意义（P>0.05）。结果见图2。
3 讨? 论
随着胃肠动力研究方法学的发展和胃肠动力生理及神经病理研究的深入，功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）的发生被认为与胃肠动力障碍、肠道菌群失调、内脏高敏感、免疫功能的改变以及中枢神经系统功能活动发生改变等多个因素密切相关[6]，而中枢神经系统被认为是其他因素变化的基础，因此，精神状态和心理因素被认为在该类疾病发病中起着非常重要的作用。
本实验模拟现实生活中情绪因素引发心身疾病的过程，通过不可预知的慢性应激刺激，复制小鼠应激性胃肠功能障碍模型。结果显示：模型组小肠推进率明显低于正常对照组，说明慢性应激对小肠动力产生明显的抑制效应，同时也说明应激性胃肠动力障碍模型制备成功。经丹皮、蒲公英及其两者配伍治疗后，小肠推进率均明显高于模型组，且丹皮组、丹皮∶蒲公英=1∶1组、丹皮∶蒲公英=2∶1组与正常对照组相比小肠推进率无明显差异，而蒲公英组和丹皮∶蒲公英=1∶2组小肠推进率明显高于正常对照组，说明蒲公英、丹皮及其不同比例的配伍均可明显提高小肠动力的效应，同时也表明合理比例的丹皮-蒲公英配伍能较好地改善应激所致的胃肠动力障碍性疾病，而蒲公英含量过多又会引起胃肠动力功能亢进的现象。蒲公英组小肠推进率明显高于丹皮及其与蒲公英的配伍组，说明蒲公英促进小肠动力效应明显高于丹皮，同时也说明丹皮配伍没有协同蒲公英增强胃肠动力效应，而是有效降低蒲公英促动力效应，两者共同调节使胃肠运动功能趋于恢复正常。
胃肠运动主要受自主神经系统和内在神经系统的共同调节。当外源性应激刺激作用于机体时，可能通过脑-肠轴改变胃肠激素的释放，引起胃肠激素水平的异常，扰乱了胃肠运动的正常节律及其生理功能，从而导致胃肠感觉、运动的变化[6，9]。中医药在治疗胃肠动力障碍疾病的机制虽然尚不完全清楚，但目前认为可能与调节胃肠激素、胃肠道微循环以及胃肠神经功能等有关[11]。蒲公英、丹皮的化学成分复杂，两者均含有黄酮类、甾醇类、酚酸类、香豆素类等多种化合物，同时丹皮还有酚苷类、单萜及其苷类[2，5]等。现代药理研究表明，蒲公英的促胃肠动力作用与其化学成分阿魏酸和齐墩果酸密切相关[12]。本实验水提取液成分复杂多样，其促动力效应成分及作用机制虽然复杂且不肯定，但是同样取得理想的实验效果，且这种用药方法更加方便而且实用，易于推广使用。中医擅于从整体出发，主张辨证论治，标本兼治，治疗效果得到大家的青睐和肯定。
本实验结果表明，蒲公英、丹皮对应激性胃肠动力障碍均具有促进作用，丹皮配伍蒲公英降低了蒲公英促动力效应，两者合适的配伍能更好地调节胃肠运动、改善胃肠功能。蒲公英和丹皮的化学、药理、机理、制剂等基础和应用研究虽然取得了一定的成果，但是其作用机制仍有待更进一步的研究。
参考文献
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（收稿日期：2020-06-28 修回日期：2020-12-16）
（編辑：潘明志）
基金项目：2017年广西壮族自治区大学生创新创业训练计划立项项目（201710599060）
作者简介：李晓潇，女，在读本科生。E-mail：841719807@qq.com
通信作者：黄丽娟。E-mail：huanglj36@163.com
[本文引用格式]李晓潇，黎璇，黄继杰，等.丹皮-蒲公英及其配伍对慢性应激小鼠胃肠动力的影响[J].右江医学，2021，49（4）：246-249.
