外周注射Ghrelin对非洲雏鸵鸟摄食的影响

    王俊　杨杰　王家乡

    摘要：为了研究Ghrelin对非洲雏鸵鸟摄食量的影响，给非洲雏鸵鸟的生长发育及饲养管理提供理论依据，试验选取16羽45日龄非洲雏鸵鸟，平均体重（5.5±0.8） kg，按照雌雄各半的原则随机分成4组（每组2个重复，每个重复2羽）。采用颈部皮下注射不同浓度Ghrelin（0 μg/kg、10 μg/kg、50 μg/kg、100 μg/kg）后，通过检测食物容器内剩余食物及水的量，观察外周应用Ghrelin对非洲雏鸵鸟摄食的影响。试验期7 d，注射剂量为1 μL/羽。结果显示，Ghrelin能够增加非洲雏鸵鸟的摄食及饮水量。

    关键词：非洲雏鸵鸟；Ghrelin；摄食；饮水

    中图分类号：S829.9 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2018）04-0005-02

    Ghrelin是由日本科学家Kojima等[1]于1999年从大鼠胃组织中提取得到的一种含28个氨基酸残基的多肽，能够促进生长激素（Growth hormone，GH）的释放。除此之外，Ghrelin在动物摄食、能量代谢、胃肠功能、生殖和免疫等方面也发挥作用[2]。但Ghrelin调节摄食具有种属差异性。研究发现，给大鼠脑室及腹腔注射Ghrelin均会增加其对食物的需求，表现明显的摄食行为，人血清中Ghrelin含量在进餐前后呈现前高后低的变化趋势，也说明了Ghrelin具有促进摄食的功能[3，4]。Ghrelin对禽类摄食的调节较哺乳动物复杂，主要受注射剂量和注射方式等影响。有研究证实，给雏鸡脑室注射Ghrelin，或者给预先空腹几小时后的雏鸡脑室注射Ghrelin，均可抑制雏鸡对食物的摄入[5]，这与哺乳动物完全不同。Ghrelin对非洲雏鸵鸟的摄食有何影响，到目前为止尚未见相关报道。本研究采用颈部皮下注射不同浓度Ghrelin后， 通过检测食物容器内剩余食物及水的量，观察外周应用Ghrelin对非洲雏鸵鸟摄食的影响，旨在为非洲雏鸵鸟的生长发育提供新的理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料

    1.1.1 试验动物 选取健康的45 d非洲雏鸵鸟为试验材料，平均体重（5.5±0.8） kg，随机分为4组（每组2个重复，每个重复2羽），雌雄不限，均来自于长江大学鸵鸟研究所。

    1.1.2 试验基础日粮 试验过程使用自配育雏料，主要由青菜配合肉用仔鸡前期配合饲料，饲料采用荆州海大饲料有限公司的产品。

    1.1.3 试验试剂 非洲鸵鸟Ghrelin， GSS（Octanoyl）FLSPEYKKIQKQKDPKKPTTKLHC由上海强耀生物科技有限公司合成.

    1.2 试验方法

    1.2.1 试验设计 通过颈部皮下注射不同浓度外源性Ghrelin，其浓度分别为0 μg/kg（对照组）、10 μg/kg、50 μg/kg、100 μg/kg，用生理盐水稀释，注射剂量为1 μL/羽，注射时间为每天上午8：00，连续注射6 d，于第7天上午8：00取材。

    1.2.2 饲养管理 整个饲养阶段在长江大学鸵鸟研究所进行，为避免影响试验效果，雏鸵鸟采用分栏饲养。每天定时给料，具体为8：00、11：00、14：00、17：00四个时间段各饲喂一次，记录每天总采食量。在试验开始前，对鸵鸟舍全场进行全面彻底喷雾式消毒，在试验期间，严格按照长江大学鸵鸟研究所消毒程序进行。

    1.2.3 摄食和饮水的计算 试验开始前对雏鸵鸟测定体重，测定体重前禁食12 h，试验过程中，记录每天摄食量和饮水量，至试验第7天时计算日均摄食量，并再次测定雏鸵鸟体重。

    1.3 统计分析

    获得的全部数据用SAS数据处理软件进行统计分析。所得数据以平均数±标准差表示，通过t检验法比较各组间的差异显著性。P<0.05为差异显著。

    2 结果与分析

    从表1中可以看出，当颈部皮下注射不同浓度的Ghrelin后，非洲雏鸵鸟的摄食量和饮水量都增加，且与对照相比差异显著（P<0.05），而体重虽然有所增加，但差异不显著（P>0.05），以上结果说明Ghrelin能够促进非洲雏鸵鸟的摄食和饮水，且呈剂量性增加。

    3 小结与讨论

    Ghrelin调节摄食具有种属差异性。许多研究表明，Ghrelin具有促进哺乳动物摄食的功能。检测人类血清中Ghrelin的含量，发现血清中Ghrelin水平在餐前升高和餐后降低，进一步证明了Ghrelin是一种摄食的引发剂[4]。而Furuse等[5]、Saito等[6]在给新生鸡的脑室内注射鸡Ghrelin或人Ghrelin后，发现新生鸡的摄食行为明显下降。Shousha 等[7]给日本鹌鹑脑室内注射Ghrelin，发现结果与Ghrelin对鸡的作用一样，也导致其食欲下降，但是当他们给日本鹌鹑腹腔注射Ghrelin时，发现Ghrelin对日本鹌鹑食欲的影响则与注射剂量有关，大剂量注射时，可导致日本鹌鹑食欲下降；小剂量注射时可刺激食欲。Cummings等[4]研究发现，当给鸡静脉内注射鸡Ghrelin 1 h后（1 nmol/100 g体重），鸡的食欲下降。然而，Kaiya等[8]研究发现，当给鸡静脉内注射鸡Ghrelin 2 h后（600 pmol/100 g体重），其食欲却没有改变。他们对产生这种现象的原因进行分析，结果认为这可能与鸡的品种有关。本研究发现，非洲雏鸵鸟颈部皮下注射不同浓度的Ghrelin ，能够促进其摄食和饮水，且呈剂量性增加，这与哺乳动物一致，而与鸡和鹌鹑不同，这进一步说明了Ghrelin 调节摄食具有种属差异性。Ghrelin对非洲鸵鸟摄食的影响机制还有待于进一步研究。

    參考文献：

    [1] KOJIMA M，HOSODA H，DATE Y，et al. Ghrelin is a growth hormone-releasing acylated peptide from stomach[J].Nature，1999，402：656-660.

    [2] SOARES J B，LEITE-MOREIRA A F. Ghrelin，des-acyl ghrelin and obestatin：three pieces of the same puzzle[J].Peptides，2008，29（7）：1255-1270.

    [3] 雷治海.Ghrelin 研究進展[J].畜牧与兽医，2005，37（5）：54-57.

    [4] CUMMINGS D E PURNELL J Q，FRAYO R S，et al.A preprandial rise in plasma ghrelin levels suggests a role in meal initiation in humans[J].Diabetes，2001，50：1714-1719.

    [5] FURUSE M，TACHIBANA T，OHGUSHI A，et al. Intracerebrovent- ricular injection of ghrelin and growth hormone releasing factor inhibits food intake in neonatal chicks[J].Neurosci Lett，2001，301：123-126

    [6] SAITO E S，KAIYA H，TACHIBANAT T，et al. Inhibitory effect of ghrelin on food intake is mediated by the corticotropin-releasing factor system in neonatal chicks[J].Regul Pept，2005，125：201-208.

    [7] SHOUSHA S，NAKAHARA K，KOJIMA M，et al. Different effects of peripheral and central ghrelin on regulation of food intake in the Japanese quail[J].Gen Comp Endocrinol，2005，141（2）：178-183.

    [8] KAIYA H，SAITO E S，TACHIBANA T，et al. Changes in ghrelin levels of plasma and proventriculus and ghrelin mRNA of proventriculus in fasted and refed layer chicks[J].Domest Anim Endocrinol，2007，32：247-259.