鹅细小病毒病的流行、诊断和预防

    隋欣

    摘要:鹅细小病毒病也称为代尔塞病、鹅肝炎、小鹅瘟,是雏鹅和雏番鸭的一种高度接触性、致死性疾病。在欧洲和远东的主要养鹅国家都有鹅细小病毒病的报道。依据特征性的临床过程、发病日龄、大体病变和组织学病变,可初诊。确诊需经过实验性的病毒分离。活苗和油乳剂灭活苗用于预防该病。

    关键词:鹅;细小病毒病;流行;临床表现;病理变化;诊断;鉴别;预防

    中图分类号:$858.33 文献标识码:B 文章编号:2095-9737(2020)06-0112-02

    1病原

    鹅细小病毒是细小病毒科的一个成员,最近被证明与人依赖病毒属相关。鹅细小病毒,除与番鸭细小病毒具有密切关系之外,与其他禽类或哺乳动物细小病毒无相似性。原发感染后,病毒主要在肠壁复制,在经过短暂的病毒血症后,进入心脏、肝脏和其他器官。

    2传播与流行

    感染禽经粪便排出大量病毒,直接或间接传播造成发病。疾病暴发通常开始于感染种鹅经蛋传播给易感雏鹅。有证据表明,亚临床感染的老龄鹅可能是病原携带者。在之前无该病的国家或地区出现鹅细小病毒病暴发时,感染种蛋通常是病毒的来源。血清学证据表明,欧洲的多种野鹅都存在有该病毒。尚未发现其他禽类带毒者或生物带毒者。

    3临床表现

    根据日龄的不同,易感雏鹅和雏鸭的临床症状差异较大。1周龄之内的禽,病程发展快,伴随有厌食,在2~5天内出现死亡。孵化室感染的雏禽,死亡率可达100%。日龄稍大的禽,病程较长,特征是鼻腔和眼有分泌物,出现腹泻,虚弱。眼睑和尾脂腺红肿。急性期幸存的雏禽表现有生长迟缓,羽毛脱落,皮肤发红,特别是背部皮肤。由于腹腔积液,雏禽常以企鹅状姿势站立。病毒对2~4周龄雏禽的致死率可达10%,但发病率可能更高。尽管成年禽可产生免疫应答,但是不表现任何临床症状。

    4病理变化

    大体病变有舌头和口腔覆盖有纤维蛋白性假膜、肝周炎、心包炎、肺水肿、肝营养不良和卡他性肠炎。急性病例,心脏呈现特征性的心尖变圆,心肌苍白。显微病变主要是心肌细胞的明显变性,在感染的细胞核内形成考德里A型包涵体。

    5诊断

    依据特征性的临床过程、发病日龄、大体病变和组织学病变,可作出初步诊断。确诊可使用来自易感鹅和番鸭的细胞培养物或胚胎进行病毒分离。通过电镜检查感染的细胞培养物,使用特异性鹅细小病毒抗血清进行中和试验,都可用来确定细小病毒的存在。使用免疫荧光和PCR(聚合酶链式反应)方法,直接检测感染禽组织中的抗原或病毒,也可确诊该病。用于鹅细小病毒的血清学检测方法,包括病毒中和试验、琼脂凝胶沉淀试验和酶联免疫吸附测定。

    现介绍常用的实验诊断方法一琼脂免疫扩散试验。

    检材的处理。血清:以0.01%的量加入硫柳汞,于4℃保存。鹅卵:吸取卵黄液20mL于盐水瓶中,加入等量的生理盐水充分振荡均匀,再加入20mL氯仿振荡30min。以3500r/min离心30min。取上清液约20mL装入透析袋内,置40%聚乙二醇中浓缩6~12h至1~2mL,吸出浓缩液。再用等量的生理盐水清洗透析袋,吸出合并于浓缩液中,控制最终浓缩倍数为5倍。最后以3500r/min离心30min,取上清液按0.01%量加入硫柳汞,冻结保存。

    琼脂平板制备。取琼脂粉1g,加入CaCl20.2g,99mL生理盐水,1%硫柳汞1mL,水浴煮沸融化。待冷至45~50℃,取琼脂液5mL,平铺于水平放置的洁净载玻片(75mm×25mm)上,静置凝固后使用。

    检验方法。打孔:用直径为5mm的金属打孔器在琼脂板上打孔,作成7孔1组的梅花圆形孔(外周6孔,中间1孔)。孔径为5mm,孔间距4mm。用针尖挑出孔中的琼脂。加样:中心孔加抗原,外周第1、4孔加标准阳性血清,第2、3、5、6孔分别加被检血清(或卵黄液)。每孔加满以不溢出为度。静置10min,放入湿盒,15~37℃反应。于24h进行第一次观察,48h作第二次观察,72h作最后观察。

    结果判定。若标准阳性血清孔与抗原孔之间应出现一条清晰的白色沉淀线,则试验成立。若没有沉淀线或沉淀线不明显,则试验应重做。①阴性反应:被检血清孔与抗原孔之间不出现沉淀线,标准阳性血清孔与抗原孔之间的沉淀线直伸延到被检血清孔边缘无弯曲者。②可疑反应:被检血清孔与抗原孔之间不形成沉淀线,邻近的标准阳性血清孔与抗原孔之间的沉淀线末端偏向被检血清孔的内侧弯曲。③阳性反应:被检血清孔与抗原孔之间出现明显、清晰的白色沉淀线,并与标准阳性血清孔的沉淀线末端相融合。

    6鉴别

    虽然鹅细小病毒引起鹅和番鸭发病,但是番鸭也感染另外一种抗原性相关的细小病毒。这种病毒可引起番鸭出现严重的疾病,但不能造成鹅发病,可使用分子生物学方法进行检测和鉴别。鉴别诊断也应包括鸭病毒性肠炎,该病可感染各种水禽。鸭病毒性肝炎是雏鸭的一种致死性疾病,但不會引起鹅和番鸭发病。鸭疫里默氏杆菌和多杀性巴氏杆菌也可引起雏鹅和番鸭出现高死亡率,但是可通过细菌分离和鉴定进行鉴别。

    7预防

    孵化的种蛋必须来源于已确认无鹅细小病毒的鹅群,很多暴发都是由于将不同来源种蛋同时孵化引起的。只从确保无鹅细小病毒病的国家进口种蛋。疫病暴发后存活的鹅不能作为种用。活苗和油乳剂灭活苗都可使用,并已广泛应用于疾病流行的国家。对种群进行免疫接种,可使其子代获得高水平的母源抗体。